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关于PCR实验室的大讨论

发布日期: 2021-07-28 浏览量:98
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关于PCR实验室的大讨论
 
 
  在净化工程领域,乐金对于实验室的设计装修是比较重视的。在实验室的规划中,PCR实验室是净化领域各界人士比较关心的重点,下面小编对PCR实验室进行相关讨论。
 
  PCR实验室在平面布局中可以分成四个单独工作区域,其中有两个区域是扩增前区,另外两个区域就是扩增后区,这两个区域是被严格划分开的,有明显的区域界线。从扩增前区流向扩增后区的实验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等,不得逆向流动。实验室的气流流向也应得到明确控制,由扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动,并且在每个工作区域应设置缓冲间,工作间与缓冲间之间宜安装连锁装置。
 
  PCR实验室呈现的一个专用走廊,试剂准备区、样品制备区、扩增区和产物分析区很规范的排列在一起的是最理想的排列模式,前三个区域都具有一个缓冲间,可供换工作服和工作鞋使用,顶上可装一紫外灯。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各试验区的压力要求。
 
  1、实验室空调通风系统设计及压力控制。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
 
  2、试剂贮存和准备区。该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。
 
  3、标本制备区,该区域主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。
 
  4、扩增反应混合物配制和扩增区,该区域主要进行的操作为DNA扩增。此外,已制备的DNA模板 (来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。
 
  5、扩增产物分析区。该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。本区是最主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

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